Krankheitsrelevante Regionen schnell und zuverlässig nachweisen
Die FISH verbindet die Methoden der klassischen Zytogenetik und der Molekulargenetik. Sie wird daher auch als molekulare Zytogenetik bezeichnet.
Mit der FISH lassen sich Gen- oder Chromosomen-Auffälligkeiten direkt in Geweben, Zellkernen oder Chromosomen nachweisen. Spezifische, synthetisch hergestellte Fluoreszenzfarbstoff-markierte Oligonukleotide dienen als Sonde zum Nachweis von kleinsten Chromosomenbereichen, die mit einem Fluoreszenz-Mikroskop analysiert werden können.
Die Methode der Fluoreszenz in-situ Hybridisierung kann an Metaphase-Chromosomen und an Interphase-Kernen durchgeführt werden.
Eine Spezialmethode in der Pränataldiagnostik ist der sog. pränatale Schnelltest. Mittels dieser speziellen FISH-Analyse können innerhalb eines Tages unkultivierte Amnionzellen auf numerische Aberrationen der Chromosomen 13, 18, 21, X und Y untersucht werden.
FISH-Analysen sind sinnvoll:
- zum Ausschluß von Mikrodeletionen und anderer chromosomaler Aberrationen (Metaphase-FISH)
- zum schnellen Nachweis der häufigsten Trisomien 13, 18 und 21 sowie der Geschlechtschromosomen (Interphase-FISH / Pränataler Schnelltest)
- zum Nachweis Leukämie-spezifischer Chromosomenaberrationen (Tumor-FISH)
| Fluoreszenz in-situ Hybridisierung (FISH) | Material | Dauer (nach Probeneingang) | |
| Metaphase-FISH | pränatal aus | ||
| Fruchtwasser | ca. 10 - 15 ml (die ersten 2 ml FW verwerfen), Lagerung u. Transport bei RT. Nie zentrifugieren! Durchführung nur zusammen mit einer konventionellen Chromosomenanalyse. |
8 - 10 Tage | |
| Chorionzotten (CVS) | mind. 20 - 30 mg, steriles Transportmedium verwenden*. Durchführung nur zusammen mit einer konventionellen Chromosomenanalyse. |
An Kultur: 8 - 10 Tage | |
| postnatal aus | |||
| Blut | Lithium-Heparin-Blut: Neugeborene: 1 - 2,5 ml Kinder & Erwachsene: 5 - 7 ml |
5 - 10 Tage | |
| Interphase-FISH | pränatal aus | ||
| Pränataler Schnelltest | Fruchtwasser | Zusätzlich zu der konventionellen Chromosomenanalyse 3 ml Fruchtwasser entnehmen. Nicht möglich bei blutigen Fruchtwasserproben. Durchführung nur zusammen mit einer konventionellen Chromosomenanalyse. | 1 - 3 Tage |
| postnatal aus | |||
| Blut | Lithium-Heparin-Blut: Neugeborene: 1 - 2,5 ml | 1 - 3 Tage | |
| Tumor-FISH | |||
| Knochenmarkpunktat (Minimum 10 x 106 mononukleäre Zellen) | 3 - 5 ml heparinisiertes Knochenmarkaspirat. Wenn auch eine zytogenetische Analyse angefordert wird: 5 - 10 ml heparinisiertes Knochenmarkaspirat. |
8 - 10 Tage | |
| Leukämieblut (Blastenanteil ≥ 20%) | 3 - 5 ml heparinisiertes peripheres Blut. Wenn auch eine zytogenetische Analyse angefordert wird: 5 - 10 ml heparinisiertes peripheres Blut. |
8 - 10 Tage | |
* Auf Anfrage erhältlich; alternativ kann ein steriles, unbeschichtetes Röhrchen mit physiol. NaCl und Antibiotikazugabe (Penicillin 100 µg/ml, Streptomycin 100 µg/ml oder Gentamycin 50 µg/ml) verwendet weden.
